免疫组化检查是应用免疫学的基本原理—抗原抗体反应，即抗原与抗体的特异性结合原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色，以确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位定性及相对定量的研究。

免疫组化的分类：按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。

1.免疫荧光细胞化学技术 将已知抗体标上荧光素以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原，在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光，从而可以确定组织中的抗原定位或定量。2.免疫酶细胞化学技术是免疫组织化学研究中最常用的技术。基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用，然后加入酶的底物生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，通过光镜或电镜对细胞或组织内的相应抗原进行定位或定性研究。3.免疫胶体金技术就是用胶体金标记一抗二抗或其他的能特异性的结合免疫球蛋白的分子等作为探针对组织或细胞内的抗原进行定性定位或定量研究。

可能有些人会问，常规病理检查已经做出诊断了，为什么还要做免疫组化？

免疫组化有以下方面的应用

1.肿瘤良恶性的判断 常规病理HE切片看的是细胞形态和组织结构，多数情况下可以直接明确诊断；但有时肿瘤形态变化而免疫组化可以给细胞做特殊标记，明确肿瘤细胞的分类。2.确定来源不明的转移瘤的原发部位 转移瘤与原发瘤通常具有共同的抗原表达性，利用多种标记物对来源不明的转移瘤进行标记，进而推断转移来源。3.确定肿瘤分期 肿瘤分期是判断预后的重要指标，与是否浸润、有无淋巴管或血管侵袭密切相关。这些在常规组织切片中很难判断，而免疫组化染色后可以比较清楚地观察到。4.对未分化恶性肿瘤进行分类 未分化恶性肿瘤在HE切片上由于肿瘤的“未分化”而缺少肿瘤细胞的起源特征，这类肿瘤通常需要免疫组化才能明确诊断。5.细胞属性的判定 通过特定抗体标记出细胞内相应的抗原成分，从而判定细胞的属性及确定肿瘤的来源。6.指导临床治疗方案 一些生物标记物可以帮助临床医生确定疾病治疗方案，如 ER（雌激素受体）和PR（孕激素受体）能够确认患者能否在内分泌治疗中获益以及预测预后；阳性应考虑内分泌治疗，阴性提示肿瘤更具有侵袭性，对内分泌治疗相对不敏感。而HER2（人表皮生长因子受体2）则能够确认患者是否适合HER2靶向治疗，针对HER2阳性的乳腺癌患者可进行靶向治疗。7.及时准确地发现微小转移灶 在常规组织切片中辨别单个或几个转移性肿瘤细胞比较困难，病理医生需要做免疫组化明确诊断。

免疫组化检查的制作

免疫组化步骤繁琐，正确有价值的免疫组化结果，需要免疫组化实验室规范的技术操。主要制作步骤为：切片→脱蜡→抗原修复→灭活内源性过氧化氢酶→加一抗孵育→加二抗→DAB显色→对比染色→脱水→透明→封片固定→显微镜观察医师进行阅片讨论，有的疑难病例有时讨论后还需补充免疫组化。因此需要耐心等待5-7个工作日才能拿到最终结果。

免疫组化如何选择？

免疫组化项目的选择是由病理医生根据显微镜下形态来进行选择。显微镜下形态有很多的不同，我们针对一个癌要选择不同的免疫组化项目，这些项目的选择就是根据不同的需要来进行的选择。

做免疫组化是不是都能确诊？

当然不是，比如在疑难的淋巴瘤诊断中，有时候做了几十种抗体还是不能确诊，须借助分子检测、DNA测序等技术辅助诊断。 

一个正确的病理诊断包含很多内容，没有免疫组化的支持，病理报告就会缺乏完整性。随着医学的发展，病理诊断更加科学严谨，为临床诊断 治疗提供更加可靠的依据！